2020年04月02日，贝达药业FGFR4抑制剂BPI-43487专利公开，该专利申请自2018年9月27日，本发明涉及一系列作为成纤维细胞生长因子受体4(FGFR4)抑制剂的化合物及其制备方法、药物组合物。本发明还涉及上述化合物或其药物组合物在治疗FGFR4介导的疾病中的用途。
2020年1月14日，贝达药业发布公告，近日收到国家药监局签发的《受理通知书》（受理号：CXHL2000010国、CXHL2000011国），公司申报的BPI-43487胶囊的药品临床试验申请已获得国家药监局受理，拟用于成纤维细胞生长因子19（Fibroblast Growth Factor-19，缩写为FGF19）扩增的肝细胞癌（Hepatocellular carcinoma，缩写为HCC）、胆管细胞癌等实体瘤的治疗，临床前研究结果显示，其抑制FGFR4的作用较强，具有确切的疗效和良好选择性，同时具有良好的体内代谢性质，安全性风险较小。此前FGFR1/2/3抑制剂BPI-17509也已经进入临床研究阶段，用于评估治疗晚期实体瘤患者的安全性和耐受性、药代动力学特征，并确定II期试验推荐剂量以及评估初步抗肿瘤疗效。
专利实施例中采用Blueprint/基石FGFR4抑制剂Fisogatinib作为对照，BPI-43487对FGFR4的抑制作用远强于对FGFR1的抑制作用，同时结果显示出对Hep3B细胞的增殖具有良好的抑制作用。
在异种移植肿瘤模型中，实施例13化合物显示出很好的抗肿瘤活性。例如，当剂量为50mg/kg、100mg/kg和200mg/kg(BID×14)时，实施例13化合物对Hep3B肿瘤体积增长抑制率分别为73.02％、86.26％和90.26％，对HepB肿瘤重量增长抑制率分别为84.76％、92.27％和98.15％，显示实施例13化合物在抑制肿瘤体积和重量方面均表现出剂量依赖效应。实施例16化合物在该模型中也显示出良好的肿瘤活性，当剂量为50mg/kg(BID×14)时，其抑制肿瘤体积和重量增长的抑制率分别是78.37％和83.85％。此外，整个实验过程中，给予实施例13和实施例16化合物的动物均未出现明显的体重降低，提示两种化合物在受试剂量条件下耐受良好。
蛋白激酶是催化蛋白质磷酸化反应的酶，在大多数情况下，这一磷酸化反应发生在蛋白质的丝氨酸(ser)、苏氨酸(thr)和酪氨酸(tyr)残基上。细胞生命历程的很多方面(例如细胞生长、分化、增殖、细胞周期和存活)均依赖于蛋白激酶的活性。而且，许多疾病(例如癌症和炎症)与蛋白激酶活性的异常有关。
目前发现酪氨酸蛋白激酶(Protein Tyrosine Kinase,PTK)有100多个家族成员，其在调节细胞的分化、生长和增殖中起重要作用。根据PTK的结构，可分为受体型和非受体型PTK两大类，前者又称跨膜PTK，后者又称细胞内PTK。
成纤维细胞生长因子受体(FGFR)属于受体型酪氨酸蛋白激酶(Receptor Tyrosine Kinase，RTK)超家族的一员，FGFR通过与成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF)结合，在不同组织中经过复杂的信号传递路径对细胞的增殖、分化和移行进行调节。FGFR为单链糖蛋白，由胞外区、单次跨膜区及细胞质内的酪氨酸激酶区组成，其中胞外区由前导肽和3个免疫球蛋白结构域构成。FGFR酪氨酸激酶家族包括FGFR1、FGFR2、FGFR3和FGFR4。其中FGFR4基因位于染色体5q35.1上，其长度约为11.3kb，有18个外显子。FGFR4蛋白属于FGFR酪氨酸激酶家族的重要成员，其第388位氨基酸位于RTK结构高度保守的跨膜区内，此结构改变所导致的FGFR4蛋白病理生理功能变化，可增强酪氨酸激酶的活性。FGFR4蛋白是一类具有自身磷酸化活性的跨膜酪氨酸激酶受体，在胚胎发育、组织修复和血管生成等进程中起着重要的作用。
FGFR4的信号通路：当配体由肝素或类肝素介导后便与FGFR4结合，致使FGFR4单体发生二聚化，随着细胞质内C末端、激酶插入区及近膜区的酪氨酸磷酸化后，A环(activation loop,A loop)激酶区经磷酸化使得FGFR4活化。活化后的FGFR4主要有两个胞内作用物：磷脂酶C和FGF受体底物2(FRS2)。
FGFR4活化后，磷脂酶C的Src同源区2(SH2)结构域便与其活化的C末端酪氨酸结合，使PLC磷酸化后结合在C末端酪氨酸位点上。激活的PLC水解其底物4,5-二磷酸磷脂酰肌醇(PIP 2)形成二酰基甘油(DAG)和三磷酸肌醇(IP 3)。IP3与细胞内特异受体结合来刺激细胞内的钙池释放Ca 2+，Ca 2+与钙调蛋白结合以激活Ca 2+/钙调蛋白依赖性蛋白激酶。另外，Ca 2+与二酰基甘油都能激活蛋白激酶C家族中的成员。PIP2水解产生的二级信号除了能激活转录因子外，还能激活多种细胞内的反应。
SOS蛋白与生长因子受体结合蛋白2(growth factor receptor bound 2,Grb2)的Src同源区3(SH3)结构域结合形成Grb2/SOS复合物，该复合物可与FGFR4相连或与FGF受体底物2α(FGFR substrate 2α，FRS2α)结合，其中FRS2α与跨膜蛋白-磷酸酪氨酸结合域(phosphotyrosine binding domain,PTB)相连，促进鸟嘌呤核苷在Ras上面交换使Ras成为Ras-GTP，从而启动下游MAPK信号通路。
FGFR4的自身磷酸化使JAK家族因子(JAK)活化，活化的JAK使FGFR4上的特异性信号蛋白吸附位点磷酸化，此位点可以充当信号传导及转录激活蛋白(signal transducer and activator of transcription,STAT)及其他信号分子的停泊位点。STAT蛋白被FGFR4的停泊位点吸附后，其C端的酪氨酸残基被JAK磷酸化，随后便脱离受体形成稳定的同源或异源二聚体并转移到细胞核中与γ干扰素活化部位(gammainterferon activation site,GAS)增强子家族成员结合，激活靶基因的转录。
小分子FGFR4抑制剂是通过阻断胞外配体分子与受体的结合或胞内激酶信号的传递，以抑制FGFR4所介导的增殖信号。目前在开发的靶向FGFR4抑制剂有多种，阿斯利康研发了FGFR4选择性抑制剂AZ709，其体外实验对高水平表达FGF19或FGFR4的细胞显示出很好的抑制效果，但体内实验无明显作用。诺华公司的FGFR4选择性抑制剂FGF401能特异性靶向FGFR4，治疗其过表达的肝癌等恶性肿瘤。H3生物医药公司的FGFR4特异性抑制剂H3B6527对FGF19基因扩增的细胞具有强抗肿瘤活性，且在小鼠和猴的动物模型中没有胆汁酸相关的不良反应。蓝图医药研发并报道了一个FGFR4特异性的抑制剂 BLU554以治疗FGFR4过表达的肝癌和胆管癌。
随着科研人员对FGFR4结构和功能关系的深入了解以及其与其它基因相互作用的深入研究，特应性强、治疗效果好且不良反应低的FGFR4将会被设计开发出来，采用FGFR4分子靶向治疗肿瘤将非常有意义。
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